Page 64 - Behdari [Elmi] - Ser 12 - Vol 6 - No 02 - Zemestan 1402-----4 [Full]_C
P. 64
112نوفک مبدوسور ک وماامدمه |
اطلاعات بیشــتری در اختیار کاربر قرار میدهد .همین ویژگی باعث دادنــد ( .)15گــزارش آنها در مورد نتایج کمی با حد تشــخیص 105
جذابتر شــدن روش LIBSبرای تجزیه و تحلیل نمونههای زیستی
میشــود ( .)19-21طیفهای حاصل از پالسهای فمتوثانیه از چند نوکلئوتیــد در میکرومتر مربع (به عنوان مثال 2×1013اتم فســفر در
جهت بهتر از طیفهای حاصل از پالسهای نانوثانیه هستند: ســانتی متر مربع) مستند شده است .تجزیه و تحلیل میکروآرایه اولیه
به دلیل دمای پایین پلاســمای طیفهای حاصل از پالس فمتوثانیه
طیفهــای نیتروژن و اکســیژن موجود در جو در طیــف نمونه ظاهر نتایج دلگرمکننده به همراه داشــت که به توســعه راههای جدیدی از
نمیشود و طیف حاصل نویز محیطی کمتری خواهد داشت. کمیشدن هیبریداسیون اسیدهای نوکلئیک منجر شد (.(15
رژیم ساییدگی خاص که انتشار پیوندهای درون مولکولی را با توجه به
بــه طــور کلــی ،روش LIBSبــرای تعیین مقــدار عناصــر مختلف
انتشار اتمی حمایت میکند.
یک مطالعه ســینتیکی دقیق روی شدت ســر باند مولکولی شرایط را در میکروارگانیســمها اســتفاده میشــود .نتایج بهدســت آمده از این
برای محققان جهت تشــخیص سهم پیوندهای CNآزاد شده توسط
نمونــه با توجه به نوترکیبــی کربن با نیتروژن اتمســفر فراهم کرد .در تحقیقــات از نظر آماری جهت یافتن راهــی برای تمایز بین گونههای
مقالات دیگر با عمق بیشــتر که توســط همین گروه منتشر شده این
پدیــده مطالعه و تأیید شــد .در نهایت ،آنها توانایی اســتفاده از روش مختلف میکروارگانیســمها بر اســاس محتوای عناصر هدف پردازش
LIBSبه عنوان یک ابزار تشــخیصی گونههای باکتریایی بر اساس
تجزیه و تحلیــل پنج گونه مختلف عوامل بیولوژیک را تأیید کردند .در شــده است .از ســوی دیگر ،برخی از محققان نشــان دادند که روش
این مطالعات مشخص شد که ویژگیهای غلظت عناصر امکان تمایز
LIBSمیتواند برای اندازهگیری سریع عناصر خاص برای پیدا کردن
دقیق باکتریهای مختلف را بوجود میآورد (.(19-21
Diedrichو همــکاران مزایای بهکارگیــری روش LIBSدر تجزیه حضور میکروارگانیسمها مورد استفاده قرار گیرد.
و تحلیــل ســویههای بیمــاریزای باکتریهــا را نشــان دادند .آنها
باکتری اشریشــیا کولی ســویه O157:H7را مورد بررسی قرار دادند چنین کاربردی از روش LIBSبرای اولین بار در ســال 2003توسط
و نتایج به دســتآمده را با ســه گونه باکتری غیر بیماریزای اشریشیا
کولی مقایســه کردند .تجزیه و تحلیل تابع تفکیک ( )DFAدر طیف مــورل و همکارانش و ســاموئلز و همکاران گزارش شــد .گروه اول،
LIBSبه دســت آمده از کلونیهای زنده بــرای هر چهار گونه انجام
شــد .با استفاده از شــدت نشــر یونی و اتمی 19که از ردیابی عناصر شــش گونه باکتری و دو گونه اســپور در فرم پلــت را تجزیه و تحلیل
غیــر آلــی منتقل میشــود ،تجزیه و تحلیــل تابع تشــخیص ،تفاوت
معنیداری بین ســویههای بیماریزا و غیر بیماریزا را نشان میدهد نمودند .نســبت شــدت به عنوان یک معیار کمی به دلیل خطی بودن
و امکان شناســایی و تمایز گونههای بیمــاریزا از گونههای محیطی
معمولی (فلور طبیعی محیط) را فراهم میکند ( .)22همین محققین و تکرارپذیری آن بهینه ســازی شده بود .تحت شــرایط آزمایشگاهی
طیفهای مختلف مربوط به سویههای باکتری را نیز مشخص کردند
که آنها را قادر به تمایز بین ســویههای اشریشــیا کولی و یک ســویه بر اســاس گزارشات منتشــر شــده ،روش LIBSتوانایی خوبی برای
از قــارچ محیطی و همچنین یک ســویه از مخمــر کاندیدا آلبیکنس
میکند ( .)22به منظور یافتن تأثیر ترکیبات مختلف محیط اســتفاده افتــراق بیــن تمام گونههــای میکروبی نشــان داد .گــروه دوم روش
شده برای کشت باکتریها ،روش LIBSبرای تجزیه و تحلیل کلونی
باکتری ســودوموناس آئروژینوزا کشت شــده در محیط کشت تریپتی LIBSرا برای افتــراق بین گونههای باکتریایی ،اســپورها ،قارچها
کیس ســوی آگار ( ،)TSAمحیط کشت آگار خوندار ،محیط کشت
انتخابــی برای القاء تغییرات غشــای باکتریایی و محیط کشــت مک و پروتئینها اســتفاده کرد .نمونههای زیســتی آماده و روی بسترهای
کانگی آگار حاوی نمکهای صفراوی انجام شد (.(23 متخلخل نقره رسوب داده شده بودند .دادههای LIBSاز شاتهای
نتایــج حاصــل از مطالعــات قبلــی در مقالهای که توســط Rehseو
همکاران گزارش شده است تأیید و توسعه داده شد ( .)24او نیز روش لیزری بهوســیله تجزیه و تحلیل اجزای اصلی مورد بررسی قرار گرفت
LIBSرا بــرای تمایز بین دو جنس مختلف باکتریهای گرم منفی و
همچنین بین چند ســویه از باکتری اشریشــیا کولی بر اساس غلظت و حــاوی اطلاعات کافــی برای تمایز در بین عوامل زیســتی متفاوت
نســبی عناصر غیرآلی در باکتری مورد استفاده قرار داد .از نقطه نظر
حد تشــخیص ( )LODبر اســاس تعداد ســلولها ،همین محققان بود (.(16،17
یک ســال پس از انتشــار اولین تجزیه و تحلیل نمونههای باکتریایی
توســط روش ، LIBSکار دیگری گزارش شــد که در آن نویســنده از
روش LIBSبرای ثبت طیف حاصل از نشــر پلاســمای کلونیهای
سلولهای رویشــی یا اسپورهای پنج ســویه باکتریایی استفاده نمود.
این باکتریها شــامل باسیلوس تورنجینســیس ،T34اشریشیا کولی
،IHII/pHT315باسیلوس ســوبتیلیس ،168باسیلوس مگاتریوم
کلســیم، (ع8م1د(ت ً.ا و باسیلوس مگاتریوم PV361بودند QM B1551
غیرآلی در ایــن نمونههای باکتریایی عناصر اصلــی
پتاســیم ،سدیم ،آهن ،منگنز و فسفات هســتند که در طیف نمونهها
به خوبی دیده شدهاند .این نویسندگان همچنین توانایی روش LIBS
برای تشــخیص ســویههای باکتریایی بر اســاس تجمعهای مختلف
عناصر متفاوت را نشان دادند.
در ســال 2006بودلت و همکارانش ســه مقاله در رابطه با استفاده از
روش LIBSجهت تجزیه و تحلیل نمونههای باکتریایی ارائه نمودند.
در اولین مقاله آنها با اســتفاده از روش LIBSو با اســتفاده از منبع
لیــزری فمتوثانیه توانایــی این روش را در شناســایی دقیق دو گونهی
باکتری اشریشــیاکولی و باسیلوس ســوبتیلیس نشان دادند .آنها در
این مقاله نشــان دادهانــد طیفهای حاصل از پالسهــای فمتوثانیه
در مقایســه بــا طیفهای حاصــل از طیفهای پالسهــای نانوثانیه
| 1402دوره | 6شماره 2 نشریه بهداری رزمی دفاع مقدس و مقاومت